RESUMO
Abstract Handroanthus impetiginosus has long been used in traditional medicine and various studies have determined the presence of bioactive chemical compounds and potential phytotherapeutics. In this study, the genotoxicity of the lyophilized tincture of H. impetiginosus bark (THI) was evaluated in mouse bone marrow using micronucleus assays. The interaction between THI and genotoxic effects induced by the chemotherapeutic agent, doxorubicin (DXR), was also analyzed. Experimental groups were evaluated 24 to 48 h after treatment with N-nitroso-N-ethylurea (NEU; 50 mg/kg), DXR (5 mg/kg), sodium chloride (NaCl; 150 mM), and THI (0.5-2 g/kg). Antigenotoxic assays were carried out using THI (0.5 g/kg) in combination with NEU or DXR. Analysis of the micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCEs) indicated no significant differences between treatment doses of THI (0.5-2 g/kg) and NaCl. Polychromatic erythrocyte (PCE) to normochromatic erythrocyte (NCE) ratios did not indicate any statistical differences between DXR and THI or NaCl, but there were differences between THI and NaCl. A significant reduction in MNPCEs and PCE/NCE ratios was observed when THI was administered in combination with DXR. This study suggested the absence of THI genotoxicity that was dose-, time-, and gender-independent and the presence of moderate systemic toxicity that was dose-independent, but time- and gender-dependent. The combination of THI and DXR also suggested antigenotoxic effects, indicating that THI reduced genotoxic effects induced by chemotherapeutic agents.
Resumo Handroanthus impetiginosus tem sido usada durante um longo período pela medicina tradicional e vários estudos têm demonstrados a presença de compostos químicos e potencial fitoterapêutico. Esta pesquisa avaliou a genotoxicidade da tintura da casca liofilizada de H. impetiginosus (THI) usando o ensaio do micronúcleo em medula óssea de camundongos. A interação entre THI e os efeitos genotóxicos induzidos pelo quimioterápico doxorrubicina (DXR) também foram analisados. Grupos experimentais foram analisados a 24-48 h após o tratamento com N-Nitroso-N-etiluréia (NEU; 50 mg/kg), DXR (5 mg/kg), NaCl (150 mM) e THI (0,5-2 g/kg). O ensaio antigenotóxico foi conduzido utilizando THI (0,5 g/kg) em combinação com NEU ou DXR. A análise de eritrócitos policromáticos micronucleados (EPCMNs) não mostrou diferenças significativas entre as doses de tratamento (0,5-2 g/kg) e NaCl. As proporções de eritrócitos policromáticos (EPC)/eritrócitos normocromáticos (ENC) não revelaram diferenças estatísticas entre DXR e THI ou NaCl, porém houve diferenças entre THI e NaCl. Uma redução significativa em EPCMNs e na razão EPC/ENC foi observada quando THI foi administrado em combinação com DXR. Essa pesquisa sugere ausência de genotoxicidade de THI, dose-, tempo- e sexo-independente, e moderada toxicidade sistêmica dose-independente, mas tempo- e sexo-dependente. A associação do THI e DXR também sugere efeitos antigenotóxicos. Por conseguinte, THI pode reduzir os efeitos genotóxicos induzidos pelo quimioterapêutico.
RESUMO
The application of gel electrophoresis and numerical analysis of yeast soluble proteins analysis to the investigation of 12 oral yeast strains belonging to five species is described. It involves one-dimensional electrophoresis of SDS-solubilized whole-cell proteins using different culture media for the cultivation of the cells, integration densitometries in the areas of the gels and percentages of the proteins extraction. These extracts were prepared from four isolates of Candida albicans, two of C. tropicalis, C. guilliermondii, C. parapsilosis and C. krusei. The extracts from whole-cells proteins using different culture media for the cultivation of the cells were fractionated by slab electrophoresis using a discontinuous buffer system. The corresponding patterns showed at least 36 polypeptides in the range of 14.4-200 kDa. Different isolates of each species were clearly different in each of the five species. The data obtained suggest that different nutritional compositions led to the expression of different proteins derived from alternatives metabolic pathways expressed by the electrophoretic profiles. The construction of a database of protein fingerprints and numerical analysis based on such data, may have some implications in the classification and identification of such species with epidemiological, ecological and taxonomic purposes. A well defined or synthetic culture media seems to be much properly.
Neste trabalho são descritas a aplicação de gel de poliacrilamida e a análise numérica no estudo de proteínas solúveis na investigação de 12 amostras de leveduras orais, pertencentes a 5 espécies. Aplicou-se a técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida na análise de proteínas de células totais, usando-se diferentes tipos de meios de cultura de células leveduriformes; densitometria de integralização da área dos géis, com a porcentagem de extração das proteínas para cada amostra de meio de cultura; além dos respectivos dendrogramas comparativos. Foram preparados extratos a partir de quatro isolados de C. albicans, dois de C. tropicalis, C. guilliermondi, C. parapsilosis e C. krusei. Os extratos foram fracionados por eletroforese em gel de acrilamida (slab), usando o sistema de tampão descontínuo. Os padrões de bandas protéicas mostraram pelo menos 36 polipeptídios entre 14.4-200 kDa. Dentre os diversos isolados de cada espécie, observaram-se diferenças significativas em cada uma das cinco espécies estudadas. Os dados obtidos sugerem que diferentes composições nutricionais presentes nos meios determinam a ex-pressão de diferentes proteínas, derivadas de mecanismos metabólicos alternativos, expressos nos perfis eletroforéticos. A construção de um banco de dados de proteínas e a análise numérica com base em dados dessa natureza podem ter implicações na diferenciação de espécies, com objetivo epidemiológico, ecológico e taxonômico. Meios nutricionalmente definidos ou sintéticos seriam mais apropriados.
